Вариант вируса гриппа в, адаптированный к мышам, для изучения лечебной и профилактической эффективности противовирусных препаратов in vitro и in vivo

Цель: разработка нового, обладающего антигенной актуальностью, штамма вируса гриппа типа В, пригодного для моделирования гриппозной инфекции у экспериментальных мышей для оценки лечебной и профилактической эффективности противовирусных препаратов in vivo и in vitro.

Mатериалы и методы: была проведена адаптация вируса гриппа В на мышах линии BALB/c. Выполнена сравнительная оценка патогенности родительского и адаптированного вариантов вируса гриппа В в экспериментах in vivo и in vitro. Используя адаптированный вариант вируса гриппа В, проведена оценка ингибирования нейраминидазы с помощью противовирусных лекарственных средств (осельтамивира этоксисукцинат, и Тамифлю®).

Результаты: полученный адаптированный вариант, вируса гриппа В штамм. В/Novosibirsk/40/2017-MA моделирует у экспериментальных животных нелетальную гриппозную инфекцию с выраженными клиническими признаками заболевания. Описаны, деструктивные изменения в лёгких и головном, мозге, нарастающие в ходе инфекции. Вирусологический анализ внутренних органов (лёгкие, головной мозг, печень, сердце, почки, селезёнка) выявил репликацию вируса гриппа только в лёгких. На данной модели гриппозной инфекции проведена оценка эффективности противовирусных лекарственных средств (осель-тамивира этоксисукцинат, и Тамифлю®) in vivo и in vitro. Доказана высокая эффективность инновационного лекарственного средства осельтамивира этоксисукцинат..

Заключение: полученный антигенно актуальный вирус гриппа В штамм В/Novosibirsk/40/2017-MA может, быть использован, для оценки эффективности противогриппозных препаратов, а также в качестве дополнительного инструмента прогнозирования эффективности вакцины, против дрейфующих штаммов.

1. Bodewes, R. Recurring influenza B virus infections in seals / R. Bodewes, D. Morick, G. de Mutsert et al. // Emerging infectious diseases. — 2013. — № 19(3). — P. 511-2

2. Osterhaus AD, Rimmelzwaan GF, Martina BE, et al. Influenza B virus in seals. Science, 2000;288(5468):1051-1053.

3. Su S, Chaves SS, Perez A, et al. Comparing clinical characteristics between hospitalized adults with laboratory-confirmed influenza A and B virus infection. Clin. Infect. Dis., 2014;59(2):252-255.

4. Чен, М. Мир в начале пандемии гриппа 2009 года. ВОЗ. Заявление для прессы Генерального директора ВОЗ д-ра Маргарет Чен 11 июня 2009 Thttps://www.who.int/mediacentre/news/statements/2009/h1n1_pandemic_phase6_20090611/ru/ (01.07.2019)

5. Adlhoch C, Snacken R, Melidou A, et al. The European Influenza Surveillance Network. Dominant influenza A(H3N2) and B/Yamagata virus circulation in EU/EEA, 2016/17 and 2017/18 seasons, respectively. Euro Surveill. 2018;23(13):pii= 18-00146. https://doi.org/10.2807/1560-7917.ES.2018.23.13.18-00146

6. ICTV. International Committee on Taxonomy of Viruses. — 2019. — http://www.Ictvonline.org/virusTaxonomy.asp

7. Chen R, Holmes EC. Avian influenza virus exhibits rapid evolutionary dynamics. Mol. Biol. Evol., 2006; 23(12):2336-2341.

8. McCullers JA, Hoffmann E, Huber VC, et al. A single amino acid change in the C-terminal domain of the matrix protein M1 of influenza B virus confers mouse adaptation and virulence. Virology, 2005;336(2):318-326.

9. McCullers JA. Insights into the interaction between influenza virus and pneumococcus. Clinical microbiology reviews, 2006;19(3):571 — 582.

10. Jain A, Dangi T, Jain B, et al. Genetic changes in influenza A(H3N2) viruses circulating during 2011 to 2013 in northern India (Lucknow). J Med. Virol., 2015;87(8):1268-1275.

11. Rota PA, Rocha ER, Harmon MW, et al. Laboratory characterization of a swine influenza virus isolated from a fatal case of human influenza. Journal of clinical microbiology, 1989;27(6):1413-1416.

12. Shaw MW, Xu X, Li Y, et al. Reappearance and global spread of variants of influenza B/Victoria/2/87 lineage viruses in the 2000-2001 and 2001-2002 seasons. Virology, 2002;303(1):1-8.

13. Kim E, Park S, Kwon H, et al. Mouse adaptation of influenza B virus increases replication in the upper respiratory tract and results in droplet transmissibility in ferrets. Scientific Reports, 2015;11(5):1-14.

14. Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza. WHO Global Influenza Surveillance Network, 2011. 153p.

15. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз., 1962. 182 с. [Ashmarin I.P., Vorobjev A.A. Statistical methods in microbiological research. L.: Medgiz., 1962. 182 p. (In Russ.)]

16. Патент на изобретение РФ № 2639158 Этил (3S,4R,5S)-4-ацетамидо-5-амино-3-(1-этилпропокси)циклогекс-1-ен-1-карбоксилата этоксисукцинат в качестве противовирусного препарата и способ его получения, опубл. 20.12.2017, МПК C07C 233/52, A61K 31/16, A61P 31/12.

17. Gubareva LV, Webster RG, Hayden FG. Detection of influenza virus resistance to neuraminidase inhibitors by an enzyme inhibition assay. Antiviral Res. 2002;53(1):47 — 61.

18. ISIRV. 2014. Panel of influenza A and B viruses is for the assessment of neuraminidase inhibitor susceptibility. https:// isirv.org/site/images/AVG_panel_leaflet_Nov14.pdf. Accessed February 2016

19. Zhang C, Zhao Z, Guo Z, et al. Amino Acid Substitutions Associated with Avian H5N6 Influenza A Virus Adaptation to Mice. Front. Microbiol. 8:1763. doi: 10.3389/fmicb.2017.01763

20. Патент на изобретение РФ № 2105063 Штамм вируса INFLUENZA В (Ленинград) 14/76/50, предназначенный для получения безвредных и высокорепродуктивных вирусов гриппа В для производства инактивированных и живых гриппозных вакцин, опубл. 20.02.1998, МПК C12N 7/00, A61K 39/145.

21. Патент на изобретение РФ № 2215786 Штамм вируса гриппа В/60/ Иоханнесбург/99/50 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей, опубл. 10.11.2003, МПК МПК C12N 7/00, A61K 39/145.

22. Патент на изобретение РФ № 2307161 Штамм вируса гриппа В/60/Джилин/03/1 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей, дата публ. 27.09.2007. МПК C12N 7/00, A61K 39/145.

23. Патент на изобретение РФ № 2605926 Штамм вируса гриппа В/60/Пхукет/2013/26 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей, опубл. 27.12.2016, МПК C12N 7/00, A61K 39/145, А61З 31/16.

24. Патент на изобретение РФ № 25229772 Холодоадаптированный штамм вируса гриппа В-В/Виктория/2/63/87, предназначенный в качестве штамма-донора аттенуации для получения реассортантов холодоадаптированных штаммов для живой гриппозной вакцины, опубл. 27.09.2014, МПК C12N 7/00, A61K 39/145.

25. Boianelli A, Nguyen VK, Ebensen T, et al. Modeling Influenza Virus Infection: A Roadmap for Influenza Research Viruses. 2015;7(10): 5274-5304. doi: 10.3390/v7102875

26. Groves HT, McDonald JU, Langat P, et al. Mouse Models of Influenza Infection with Circulating Strains to Test Seasonal Vaccine Efficacy. Front. Immunol. 2018;9:126. doi: 10.3389/fimmu.2018.00126

27. Santos JJS, Finch C, Sutton T, et al. Development of an alternative modified live influenza B virus vaccine. J. Virol. 2017, doi:10.1128/JVI.00056-17

28. Asahi Y, Yoshikawa T, Watanabe I, et al. Protection against influenza virus infection in polymeric Ig receptor knockout mice immunized intranasally with adjuvant-combined vaccines. J. Immunol., 2002;168(6):2930-2938.

29. Sakai K, Ami Y, Nakajima N, et al. TMPRSS2 Independency for Haemagglutinin Cleavage In Vivo Differentiates Influenza B Virus from Influenza A. Virus. Sci Rep., 2016;6: 1-10.

30. WHO. (2018). http://www.euro.who.int/ru/health-topics/communicable-diseases/influenza/seasonal-influenza/clinical-management/about-antiviral-drugs

31. Бурцева, Е.И. Обзор данных по эффективности и мониторинг чувствительности к осельтамивиру штаммов вирусов гриппа / Е.И. Бурцева // Врач. —2010. — № 12. — С. 67-70.