jofinЖурнал инфектологииJournal Infectology2072-6732IPO “АIDSSPbR"10.22625/2072-6732-2012-4-2-33-39jofin-96Research ArticleОригинальные исследованияOriginal ResearchИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ И ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ В ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ГРАНУЛОЦИТАРНОГО АНАПЛАЗМОЗА ЧЕЛОВЕКАEnzyme-linked immunosorbent assay and polymerase chain reaction in the laboratory diagnosis of human granulocytic anaplasmosisТетеринВ. Ю.TeterinV. Yu.

аспирант кафедры инфекционных болезней Пермской государственной медицинской академии им. академика Е.А. Вагнера; тел.: (342)236-45-66

voltair_777@yahoo.comКоренбергЭ. И.KorenbergE. I.

руководитель отдела природноочаговых инфекций НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, заслуженный деятель науки РФ, академик РАЕН, д.б.н., профессор; тел.: (499)190-43-69

edkorenberg@yandex.ruНефедоваВ. В.NefedovaV. V.

старший научный сотрудник лаборатории переносчиков инфекций НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, к.б.н.; тел.: (499)190-43-69

valentinnef@mtu-net.ruВоробьеваН. Н.Vorob’ovaN. N.

заведующая кафедрой инфекционных болезней Пермской государственной медицинской академии им. академика Е.А. Вагнера, д.м.н., профессор; тел.: (342)236-45-66

infect-perm@mail.ruФризенВ. И.FrizenV. I.

главный врач Краевой клинической инфекционной больницы, к.м.н.; тел.: (342)236-42-68

infect-perm@mail.ruПермская государственная медицинская академия им. академика Е.А. Вагнера, ПермьРоссияPerm State Medical Academy named by academician E.A. Wagner, PermRussian FederationНаучно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, МоскваРоссияResearch Institute of Epidemiology and Microbiology named by N.F. Gamaleya, MoscowRussian FederationКраевая клиническая инфекционная больница, ПермьРоссияPerm Regional Hospital of Infectious Diseases, PermRussian Federation201212092014423339Copyright © Тетерин В.Ю., Коренберг Э.И., Нефедова В.В., Воробьева Н.Н., Фризен В.И., 20142014Тетерин В.Ю., Коренберг Э.И., Нефедова В.В., Воробьева Н.Н., Фризен В.И.Teterin V.Y., Korenberg E.I., Nefedova V.V., Vorob’ova N.N., Frizen V.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.niidi.ru/jofin/article/view/96

Проведена диагностика гранулоцитарного анаплазмоза человека с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) у 332 пациентов, находившихся на лечении в краевой клинической инфекционной больнице г. Перми в весенне-летний период 2010 г. с острыми лихорадочными заболеваниями после присасывания клещей. В динамике болезни исследовано 845 сывороток крови тест-системами ООО «Омникс» ГАЧ-ИФА-IgM и ГАЧ-ИФА-IgG, а также 952 пробы сухих пятен крови методом «nested» ПЦР с использованием праймеров ge3a1-ge10r2 и ge9f3-ge2r4 для амплификации генетического материала A. phagocytophilum. Определены оптимальные сроки использования ИФА и ПЦР. Обоими методами анаплазмоз подтвержден у 79 пациентов (ИФА – у 68, ПЦР – у 25). В целом, серодиагностику, в частности ИФА, и ПЦР следует рассматривать не как альтернативные, а как взаимодополняющие друг друга методы лабораторной диагностики анаплазмоза.

With the help of enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and polymerase chain reaction (PCR) in 332 patients with acute feverish illness after a tick bite, treated at the Perm Regional Hospital of Infectious Diseases in the spring-summer period of 2010, the diagnostics of human granulocytic anaplasmosis was performed. By Omnix’s testsystems HGA-ELISA-IgM and HGA-ELISA-IgG 845 serum, as well as by «nested» PCR, using primers ge3a1-ge10r2 and ge9f3-ge2r4 for A. phagocytophilum genetic material amplification, 952 samples of dried blood spots were studied in the dynamics of the disease. The optimal period for the use of ELISA and PCR was determined. Anaplasmosis was confirmed by both methods in 79 patients (ELISA – in 68, PCR –in 25). In general, serodiagnosis, particularly ELISA, and PCR should be regarded not as alternative but as complementary to each other’s methods of laboratory diagnosis of anaplasmosis.

гранулоцитарный анаплазмоз человекаиммуноферментный анализполимеразная цепная реакцияhuman granulocytic anaplasmosisenzymelinked immunoassaypolymerase chain reactionReferencesHuman granulocytic ehrlichiosis in the upper midwest United States. A new species emerging? / J.S. Bakken [et al.] //JAMA. – 1994. – № 3. – P. 212–218.Human granulocytic ehrlichiosis in the upper midwest United States. A new species emerging? / J.S. Bakken [et al.] //JAMA. – 1994. – № 3. – P. 212–218.Identification of a granulocytotropic Ehrlichia species as the etiologic agent of human disease / S.M. Chen [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 1994. – № 3. – P. 589–595.Identification of a granulocytotropic Ehrlichia species as the etiologic agent of human disease / S.M. Chen [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 1994. – № 3. – P. 589–595.Выявление в России природных очагов бабезиоза и гранулоцитарного эрлихиоза / С.Р. Телфорд [и др.] // Журнал микробиологии – 2002. – № 6. – С. 21–25.Выявление в России природных очагов бабезиоза и гранулоцитарного эрлихиоза / С.Р. Телфорд [и др.] // Журнал микробиологии – 2002. – № 6. – С. 21–25.Клинико-лабораторная характеристика гранулоцитарного эрлихиоза человека на юге Дальнего Востока России / Ю.Н. Сидельников [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2002. – № 3. – С. 28–31.Клинико-лабораторная характеристика гранулоцитарного эрлихиоза человека на юге Дальнего Востока России / Ю.Н. Сидельников [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2002. – № 3. – С. 28–31.Афанасьева, М.В. Клинико-эпидемиологическая характеристика гранулоцитарного анаплазмоза человека в России (на примере Пермского края) : автореф….дис. канд. мед. наук / М.В. Афанасьева. – М., 2006. – 20 с.Афанасьева, М.В. Клинико-эпидемиологическая характеристика гранулоцитарного анаплазмоза человека в России (на примере Пермского края) : автореф….дис. канд. мед. наук / М.В. Афанасьева. – М., 2006. – 20 с.Клинико-лабораторная апробация новых отечественных тест-систем для серологической верификации моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза человека / М.В. Афанасьева [и др.] // Эпидемиология и вакцинопрофилактика – 2005. – № 1. – С. 45–48.Клинико-лабораторная апробация новых отечественных тест-систем для серологической верификации моноцитарного эрлихиоза и гранулоцитарного анаплазмоза человека / М.В. Афанасьева [и др.] // Эпидемиология и вакцинопрофилактика – 2005. – № 1. – С. 45–48.Гранулоцитарный анаплазмоз человека: особенности клинических проявлений в России / М.В. Афанасьева [и др.] // Инфекционные болезни. – 2006. – № 2. – С. 24–28.Гранулоцитарный анаплазмоз человека: особенности клинических проявлений в России / М.В. Афанасьева [и др.] // Инфекционные болезни. – 2006. – № 2. – С. 24–28.Ермак, Т.Н. Эрлихиозы / Т.Н. Ермак // Инфекционные болезни: национальное руководство / под ред. Н.Д. Ющука, Ю.Я. Венгерова. – М., 2009. – С. 576–582.Ермак, Т.Н. Эрлихиозы / Т.Н. Ермак // Инфекционные болезни: национальное руководство / под ред. Н.Д. Ющука, Ю.Я. Венгерова. – М., 2009. – С. 576–582.Дальнейшие наблюдения в природных очагах клещевого риккетсиоза на территории Алтайского края / А.С. Оберт [и др.] // Эпидемиология и инфекцинные болезни. – 2007. – № 4. – С. 34–36.Дальнейшие наблюдения в природных очагах клещевого риккетсиоза на территории Алтайского края / А.С. Оберт [и др.] // Эпидемиология и инфекцинные болезни. – 2007. – № 4. – С. 34–36.Инфекции, передающиеся иксодовыми клещами, в северных районах Омской области / Н.А. Пеньевская [и др.] // Пермский медицинский журнал. – 2009. – № 5. – С. 32–39.Инфекции, передающиеся иксодовыми клещами, в северных районах Омской области / Н.А. Пеньевская [и др.] // Пермский медицинский журнал. – 2009. – № 5. – С. 32–39.Клещевые микстинфекции (иксодовый клещевой боррелиоз и гранулоцитарный эрлихиоз человека) в Ярославской области / Е.С. Алешковская [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2008. – № 2. – С. 6–8.Клещевые микстинфекции (иксодовый клещевой боррелиоз и гранулоцитарный эрлихиоз человека) в Ярославской области / Е.С. Алешковская [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2008. – № 2. – С. 6–8.Коренберг, Э.И. Эрлихиозы – новая для России проблема инфекционной патологии / Э.И. Коренберг // Медицинская паразитология. – 1999. – № 4. – С. 10–16.Коренберг, Э.И. Эрлихиозы – новая для России проблема инфекционной патологии / Э.И. Коренберг // Медицинская паразитология. – 1999. – № 4. – С. 10–16.Serial measurements of hematological counts during the active phase of human granulocytic ehrlichiosis / J.S. Bakken [et al.] // Clin. Infect. Dis. – 2001. – № 6. – P. 862–870.Serial measurements of hematological counts during the active phase of human granulocytic ehrlichiosis / J.S. Bakken [et al.] // Clin. Infect. Dis. – 2001. – № 6. – P. 862–870.Bakken, J.S. Human granulocytic ehrlichiosis /J.S. Bakken, J.S. Dumler // Clin. Infect. Dis. – 2000. – № 2. –P. 554–560.Bakken, J.S. Human granulocytic ehrlichiosis /J.S. Bakken, J.S. Dumler // Clin. Infect. Dis. – 2000. – № 2. –P. 554–560.Walker, D.H. Diagnosing human ehrlichioses: current status and recommendations / D.H. Walker // Am. Soc. Microbiol. News. – 2000. – № 5. – P. 287–290.Walker, D.H. Diagnosing human ehrlichioses: current status and recommendations / D.H. Walker // Am. Soc. Microbiol. News. – 2000. – № 5. – P. 287–290.Direct cultivation of the causative agent of human granulocytic ehrlichiosis / J.L. Goodman [et al.] // N. Engl. J. Med. – 1996. – № 4. – P. 209–215.Direct cultivation of the causative agent of human granulocytic ehrlichiosis / J.L. Goodman [et al.] // N. Engl. J. Med. – 1996. – № 4. – P. 209–215.Serology of culture-confirmed cases of human granulocytic ehrlichiosis / M. E. Aguero-Rosenfeld [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2000. – № 2. – P. 635–638.Serology of culture-confirmed cases of human granulocytic ehrlichiosis / M. E. Aguero-Rosenfeld [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2000. – № 2. – P. 635–638.Serodiagnosis of human granulocytic ehrlichiosis by a recombinant HGE-44 – based enzyme-linked immunosorbent assay / J.W. Ijdo [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 1999. – № 11. – P. 3540–3544.Serodiagnosis of human granulocytic ehrlichiosis by a recombinant HGE-44 – based enzyme-linked immunosorbent assay / J.W. Ijdo [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 1999. – № 11. – P. 3540–3544.Western blot analysis of sera reactive to human monocytic ehrlichiosis and human granulocytic ehrlichiosis agents / А. Unver [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2001. – № 11. – P. 3982–3986.Western blot analysis of sera reactive to human monocytic ehrlichiosis and human granulocytic ehrlichiosis agents / А. Unver [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2001. – № 11. – P. 3982–3986.False-positive Lyme disease serology in human granulocytic ehrlichiosis / G.P. Wormser [et al.] // Lancet. – 1996. – № 9006. – P. 981–982.False-positive Lyme disease serology in human granulocytic ehrlichiosis / G.P. Wormser [et al.] // Lancet. – 1996. – № 9006. – P. 981–982.Ismail, N. Human ehrlichiosis and anaplasmosis /N. Ismail, K.C. Bloch, J.W. McBride // Clin. Lab. Med. –Ismail, N. Human ehrlichiosis and anaplasmosis /N. Ismail, K.C. Bloch, J.W. McBride // Clin. Lab. Med. –– №1. – P. 261–292.– №1. – P. 261–292.Clinical and laboratory characteristics of human granulocytic ehrlichiosis / J.S. Bakken [et al.] // JAMA. –1996. – № 3. – P. 199–205.Clinical and laboratory characteristics of human granulocytic ehrlichiosis / J.S. Bakken [et al.] // JAMA. –1996. – № 3. – P. 199–205.Aguero-Rosenfeld, M.E. Diagnosis of human granulocytic ehrlichiosis: state of the art / M.E. Aguero-Rosenfeld // Vector Borne Zoonotic Dis. – 2002. – № 4. – P. 233–239.Aguero-Rosenfeld, M.E. Diagnosis of human granulocytic ehrlichiosis: state of the art / M.E. Aguero-Rosenfeld // Vector Borne Zoonotic Dis. – 2002. – № 4. – P. 233–239.Dumler, J.S. Tick-borne ehrlichioses / J.S. Dumler, D.H. Walker // Lancet. – 2001. – № 1. – P. 21–28.Dumler, J.S. Tick-borne ehrlichioses / J.S. Dumler, D.H. Walker // Lancet. – 2001. – № 1. – P. 21–28.Bakken, J.S. Clinical diagnosis and treatment of human granulocytotropic anaplasmosis / J.S. Bakken, J.S. Dumler // Ann. N.Y. Acad. Sci. – 2006. – V. 1078. – P. 236–247.Bakken, J.S. Clinical diagnosis and treatment of human granulocytotropic anaplasmosis / J.S. Bakken, J.S. Dumler // Ann. N.Y. Acad. Sci. – 2006. – V. 1078. – P. 236–247.Thomas, R.J. Current management of human granulocytic anaplasmosis, human monocytic ehrlichiosis and Ehrlichia ewingii ehrlichiosis / R.J. Thomas, J.S. Dumler, J.A. Carlyon // Expert Rev. Anti. Infect. Ther. – 2009. – № 6. – P. 709–722.Thomas, R.J. Current management of human granulocytic anaplasmosis, human monocytic ehrlichiosis and Ehrlichia ewingii ehrlichiosis / R.J. Thomas, J.S. Dumler, J.A. Carlyon // Expert Rev. Anti. Infect. Ther. – 2009. – № 6. – P. 709–722.Nested PCR assay for detection of granulocytic ehrlichiae / R.F. Massung [et al.] // J. Clin. Microbiol. –Nested PCR assay for detection of granulocytic ehrlichiae / R.F. Massung [et al.] // J. Clin. Microbiol. –– № 4. – P. 1090–1095.– № 4. – P. 1090–1095.Improved sensitivity of PCR for diagnosis of human granulocytic ehrlichiosis using epank1 genes of Ehrlichia phagocytophila – group ehrlichiae / J.J. Walls [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2000. – № 1. – P. 354–356.Improved sensitivity of PCR for diagnosis of human granulocytic ehrlichiosis using epank1 genes of Ehrlichia phagocytophila – group ehrlichiae / J.J. Walls [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2000. – № 1. – P. 354–356.Edelman, D.C. Evaluation of an improved PCR diagnostic assay for human granulocytic ehrlichiosis / D.C. Edelman, J.S. Dumler // Mol. Diag. – 1996. –№ 1. – P. 41–49.Edelman, D.C. Evaluation of an improved PCR diagnostic assay for human granulocytic ehrlichiosis / D.C. Edelman, J.S. Dumler // Mol. Diag. – 1996. –№ 1. – P. 41–49.Микроорганизмы порядка Rickettsiales у таежного клеща (ixodes persulcatus sch.) в Предуралье / В.В. Нефедова [и др.] // Вестник Российской АМН. – 2008. – № 7. – С. 47–50.Микроорганизмы порядка Rickettsiales у таежного клеща (ixodes persulcatus sch.) в Предуралье / В.В. Нефедова [и др.] // Вестник Российской АМН. – 2008. – № 7. – С. 47–50.Silaghi, C. Genetic variants of Anaplasma phagocytophilum from 14 equine granulocytic anaplasmosisSilaghi, C. Genetic variants of Anaplasma phagocytophilum from 14 equine granulocytic anaplasmosiscases / C. Silaghi, G. Liebisch, K. Pfister // Parasit. Vectors. – 2011. – № 4. – P. 161.cases / C. Silaghi, G. Liebisch, K. Pfister // Parasit. Vectors. – 2011. – № 4. – P. 161.Serodiagnosis of human granulocytic ehrlichiosis by using novel combinations of immunoreactive recombinant proteins / M.J. Lodes [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2001. – № 7. – P. 2466–2476.Serodiagnosis of human granulocytic ehrlichiosis by using novel combinations of immunoreactive recombinant proteins / M.J. Lodes [et al.] // J. Clin. Microbiol. – 2001. – № 7. – P. 2466–2476.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.