jofinЖурнал инфектологииJournal Infectology2072-6732IPO “АIDSSPbR"10.22625/2072-6732-2013-5-3-5-12jofin-180Research ArticleОбзорыReviewСОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ СLOSTRIDIUM DIFFICILE – АССОЦИИРОВАННОЙ ИНФЕКЦИИModern Recent on the Laboratory Diagnosis of Clostridium Difficile-associated InfectionКветнаяА. С.Kvet naya,A. S.

ведущий научный сотрудник, руководитель отдела микроэкологии человека Научно-исследовательского института детских инфекций ФМБА России д.м.н., профессор; тел.: 8(812)234-36-73; +7-911-713-64-96

МакридиП. С.MakridiP. S.

врач-инфекционист отдела кишечных инфекций Научно- исследовательского института детских инфекций ФМБА России, заочный аспирант отдела микроэкологии человека Научно-исследовательского института детских инфекций ФМБА России; тел.: 8(812)234-36-73;+7-952-216-01-93;

БехтереваМ. К.BehterevaM. K.

старший научный сотрудник, руководитель отдела кишечных инфекций Научно-исследовательского института детских инфекций ФМБА России к.м.н.; тел.: 8(812)234-52-30; +7-911-749-44-02

Научно-исследовательский институт детских инфекций ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссияScince Research Institute of Children’s Infection of FMBA of Russia , Saint-PetersburgRussian Federation20131609201453512Copyright © Кветная А.С., Макриди П.С., Бехтерева М.К., 20142014Кветная А.С., Макриди П.С., Бехтерева М.К.Kvet naya, A.S., Makridi P.S., Behtereva M.K.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.niidi.ru/jofin/article/view/180

В обзоре представлены современные сведения о лабораторной диагностике Clostridium difficile – ассоциированной инфекции. Дана критическая оценка эффективности и специфичности современным методам диагностики: методам выделения и идентификации культур Clostridium difficile на основе изучения биохимических характеристик, использования тест-систем – API 20A и Rapid Ana II-тестов, определения белковых спектров с помощью MALDI-TOF масс-спектрометрии. Описаны способы выявления токсигенных штаммов Clostridium difficile на основе Дот-иммуноблотинга, ПЦР и иммунохроматографии, а также методы индикации токсинов Clostridium difficile в пробах кала на основе определения цитотоксического действия токсинов на культуре ткани, реакции латекс-агглютинации, иммуноферментного и фермент-связанного флюоресцентного анализа.

In the review the current information on the laboratory diagnosis of Clostridium difficile-associated infection. Made a critical assessment of the effectiveness and specificity of the modern methods of diagnosis: methods of isolation and identification of Clostridium difficile cultures by studying the biochemical characteristics, the use of test kits – API 20A and Rapid Ana II-tests, determination of protein spectra by means of MALDI-TOF mass spectrometry. Describes how to display toxigenic strains of Clostridium difficile based on Dot-immunoblotting, PCR, and immunochromatography, as well as methods for determining the toxin Clostridium difficile in stool samples by determining the cytotoxic effect of toxins on tissue culture, latex agglutination test, ELISA and enzyme-linked fluorescent assay.

Clostridium difficile – ассоциированная инфекциятоксиныметоды лабораторной диагностикиClostridium difficileClostridium difficile – associated diseasetoxinslaboratory diagnosticsReferencesМалов, В.А. Роль Clostridium difficile в патологии человека / В.А. Малов, В.М. Бондаренко, С.Г. Пак // Журн. микробиол. –1996. – № 1. – С. 91–96.Малов, В.А. Роль Clostridium difficile в патологии человека / В.А. Малов, В.М. Бондаренко, С.Г. Пак // Журн. микробиол. –1996. – № 1. – С. 91–96.Лобзин, Ю.В. Современные представления об инфекции Clostridium difficile / Ю.В. Лобзин, С.М. Захаренко, Г.А. Иванов // Клин. микроб. антимикроб. химиотер. – 2002. – Т. 4, № 3. – С. 200–232.Лобзин, Ю.В. Современные представления об инфекции Clostridium difficile / Ю.В. Лобзин, С.М. Захаренко, Г.А. Иванов // Клин. микроб. антимикроб. химиотер. – 2002. – Т. 4, № 3. – С. 200–232.Soler , P. Rates of Clostridium difficile infectio n in patie nts disc har ged from Spanis h hos pitals , 1997–2005 in The Net her la nds / P. Soler , F. Nogareda , R. Cano // Cli n. Infect. Dis. – 2007. – V. 45. – P. 695–703.Soler , P. Rates of Clostridium difficile infectio n in patie nts disc har ged from Spanis h hos pitals , 1997–2005 in The Net her la nds / P. Soler , F. Nogareda , R. Cano // Cli n. Infect. Dis. – 2007. – V. 45. – P. 695–703.Lyyti kai nen, O. Hos pitalizatio ns and deat hs associ ated wit h Clostridium difficile infectio n, Finla nd, 1996–2004 / O. L O. L yyti kai nen [et al. ] // Emer g. Infect. Dis. – 2009. – V. 15. – P. 761–765.Lyyti kai nen, O. Hos pitalizatio ns and deat hs associ ated wit h Clostridium difficile infectio n, Finla nd, 1996–2004 / O. L O. L yyti kai nen [et al. ] // Emer g. Infect. Dis. – 2009. – V. 15. – P. 761–765.Clostridium difficile , Met hods in Molecular Biolo gy / P. Mulla ny, A.P. Roberts (eds. ) // Spri nger Scie nce +Busi ness Media , LL C. – 2010. – 646 p.Clostridium difficile , Met hods in Molecular Biolo gy / P. Mulla ny, A.P. Roberts (eds. ) // Spri nger Scie nce +Busi ness Media , LL C. – 2010. – 646 p.Zil ber ber g, M.D. Clostridium difficile Infectio ns amo ng Hos pitalized Childre n, United States , 1997–2006 / M.D. Zil ber ber g, G.S. Tillotso n, L. C. McDonald // Emer g. Infect. Dis. – is. – April 2010. – V. 16, № 4. – P. 604–609.Zil ber ber g, M.D. Clostridium difficile Infectio ns amo ng Hos pitalized Childre n, United States , 1997–2006 / M.D. Zil ber ber g, G.S. Tillotso n, L. C. McDonald // Emer g. Infect. Dis. – is. – April 2010. – V. 16, № 4. – P. 604–609.Захаренко. С.М. Заболевания, ассоциированные с Clostridium difficile / С.М. Захаренко, С.В. Пономарев // Лечение и профилактика. – 2012. – T. 3, № 4. – С. 82–89.Захаренко. С.М. Заболевания, ассоциированные с Clostridium difficile / С.М. Захаренко, С.В. Пономарев // Лечение и профилактика. – 2012. – T. 3, № 4. – С. 82–89.Bacci. S. Binar y to xin and deat h after Clostridium difficile infectio n / S. Bacci [et al. ] // Emer ging infectio ns diseases. – 2011. – V. 17, № 6. – P. 976–982.Bacci. S. Binar y to xin and deat h after Clostridium difficile infectio n / S. Bacci [et al. ] // Emer ging infectio ns diseases. – 2011. – V. 17, № 6. – P. 976–982.Vital Signs: Pre venti ng Clostridium difficile Infectio ns // MMWR. – 2012. – V. 61, № 9. – P. 157–162.Vital Signs: Pre venti ng Clostridium difficile Infectio ns // MMWR. – 2012. – V. 61, № 9. – P. 157–162.Kato , H. Anal ysis of Clostridium difficile Isolates from Nosocomial Out brea ks at Three Hos pitals in Diverse Areas of Japan / H. Kato [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 2001. – V. 39. – . – P. 1391–1395.Kato , H. Anal ysis of Clostridium difficile Isolates from Nosocomial Out brea ks at Three Hos pitals in Diverse Areas of Japan / H. Kato [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 2001. – V. 39. – . – P. 1391–1395.Van Dijck, P. Genot yping of out brea k related and sporadic isolates of Clostridium difficile belo nging to sero grou p C / P. Van Dijck, V. Avesa ni, M. Delmee // J. Cli n. Micro biol. – 1996. – V. 34. – P. 3049–3055.Van Dijck, P. Genot yping of out brea k related and sporadic isolates of Clostridium difficile belo nging to sero grou p C / P. Van Dijck, V. Avesa ni, M. Delmee // J. Cli n. Micro biol. – 1996. – V. 34. – P. 3049–3055.Rupnik, M. Hetero genei of lar ge clostridium to xin: im porta nce of Clostridium difficile to xinot ypes // FEMS Micro biol. Rev. – 2008. – V. 32. – P. 541–555.Rupnik, M. Hetero genei of lar ge clostridium to xin: im porta nce of Clostridium difficile to xinot ypes // FEMS Micro biol. Rev. – 2008. – V. 32. – P. 541–555.Khanna, S. The epidemiolo gy of commu nit y- ac qquired Clostridium difficile infectio : a populatio n-based stud y / S. Khanna [et al. ] // Am. J. Gastroe nterol. – 2012. – V.107, №1. – P. 89–95.Khanna, S. The epidemiolo gy of commu nit y- ac qquired Clostridium difficile infectio : a populatio n-based stud y / S. Khanna [et al. ] // Am. J. Gastroe nterol. – 2012. – V.107, №1. – P. 89–95.Шульпекова, Ю.А. Антибиотикоассоциированная диарея // Русский медицинский журнал. – 2007. – Т. 15, № 6. – С. 1–6.Шульпекова, Ю.А. Антибиотикоассоциированная диарея // Русский медицинский журнал. – 2007. – Т. 15, № 6. – С. 1–6.Hensgens, M.P. Time inter val of increased ris k for Clostridium difficile infectio n after exposure to anti biotics / M.P. Hensgens [et al. ]// J. Antimicro b. Chemot her. – 2012. – V. 67, № 3. – P. 742–748.Hensgens, M.P. Time inter val of increased ris k for Clostridium difficile infectio n after exposure to anti biotics / M.P. Hensgens [et al. ]// J. Antimicro b. Chemot her. – 2012. – V. 67, № 3. – P. 742–748.Sundram , F. Clostridium difficile ri bot ypes 027 and 106: cli nical outcomes and ris k factors / F. Sundram [et al. ] // J. Hos p. Infect. – 2009. – V. 72. – P. 111–118.Sundram , F. Clostridium difficile ri bot ypes 027 and 106: cli nical outcomes and ris k factors / F. Sundram [et al. ] // J. Hos p. Infect. – 2009. – V. 72. – P. 111–118.Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. – М.: БИНОМ, 2010. – 1152 с.Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и диагностика инфекций / под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. – М.: БИНОМ, 2010. – 1152 с.Geor ge, W.L. Selecti ve and differe ntial medium for iso latio n of Clostridium difficile / W.L. Geor ge [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1979. – V. – Р. 21–219.Geor ge, W.L. Selecti ve and differe ntial medium for iso latio n of Clostridium difficile / W.L. Geor ge [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1979. – V. – Р. 21–219.Kafiz , S. Clostridium difficile : isolatio n and characteris tics / S. Kafiz. , C.L. Oa kle y // J. Med. Micro biol. – 1976. – № 9. – Р. 129–137.Kafiz , S. Clostridium difficile : isolatio n and characteris tics / S. Kafiz. , C.L. Oa kle y // J. Med. Micro biol. – 1976. – № 9. – Р. 129–137.Van Vee n, S.Q. High-t hrou ghput ide ntificatio n of bacte ria and yeast by matri x-assisted laser desor ptio n io nizatio n-time of fli ght mass spectrometr y in co nventio nal medical micro biol ogy la boratories / S.Q. Van Vee n, E.C. Claas , E.J. Kui jper // J. Cli n. Micro biol. – 2010. – V. 48, №3. – P. 900–907.Van Vee n, S.Q. High-t hrou ghput ide ntificatio n of bacte ria and yeast by matri x-assisted laser desor ptio n io nizatio n-time of fli ght mass spectrometr y in co nventio nal medical micro biol ogy la boratories / S.Q. Van Vee n, E.C. Claas , E.J. Kui jper // J. Cli n. Micro biol. – 2010. – V. 48, №3. – P. 900–907.Dar koh, Ch. Novel One- Ste p Met hod for Detectio n of Clostridium difficile Strai ns Directl y from Isolatio n of Acti ve- Toxin-Produci ng Stool Sam ples / Ch. Dar koh, H.L. DuPo nt, H.B. Kapla n // J. Cli n. Micro biol. – 2011. – V. 49, №12. – P. 4219.Dar koh, Ch. Novel One- Ste p Met hod for Detectio n of Clostridium difficile Strai ns Directl y from Isolatio n of Acti ve- Toxin-Produci ng Stool Sam ples / Ch. Dar koh, H.L. DuPo nt, H.B. Kapla n // J. Cli n. Micro biol. – 2011. – V. 49, №12. – P. 4219.Wille y, S.H. Cultures for Clostridium difficile in stools co ntai ning a cytoto xin neutralized by Clostridium sordellii antito xin / S.H. Wille y, J.G. Bartlett // J. Cli n. Micro biol. – 1979. – V. 10. – P. 880–884.Wille y, S.H. Cultures for Clostridium difficile in stools co ntai ning a cytoto xin neutralized by Clostridium sordellii antito xin / S.H. Wille y, J.G. Bartlett // J. Cli n. Micro biol. – 1979. – V. 10. – P. 880–884.Goor huis , A. Applicatio n of multi ple-locus varia ble- num ber ta ndem-re peat anal ysis to determi ne clo nal spread of to xin A-negati ve Clostridium difficile in a general hos pital in Bue nos Aires , Argenti na / A. Goor huis [et al. ] // Cli n. Micro biol. Infect. – 2009. – V. 15. – P. 1080–1086.Goor huis , A. Applicatio n of multi ple-locus varia ble- num ber ta ndem-re peat anal ysis to determi ne clo nal spread of to xin A-negati ve Clostridium difficile in a general hos pital in Bue nos Aires , Argenti na / A. Goor huis [et al. ] // Cli n. Micro biol. Infect. – 2009. – V. 15. – P. 1080–1086.Kato , N. Ide ntificatio n of to xigenic Clostridium difficile by the pol ymerase chai n reactio n / N. Kato [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1991. – V. 29. – Р. 33–37.Kato , N. Ide ntificatio n of to xigenic Clostridium difficile by the pol ymerase chai n reactio n / N. Kato [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1991. – V. 29. – Р. 33–37.Kuhl, S.J. Dia gnosis and mo nitori ng of Clostridium dif ficile infectio ns wit h the pol ymerase chai n reactio n / S.J. Kuhl [et al. ] // Cli n. Infect. Dis. – 1993. – V. 16 (Suppl 4). – Р. 234–238.Kuhl, S.J. Dia gnosis and mo nitori ng of Clostridium dif ficile infectio ns wit h the pol ymerase chai n reactio n / S.J. Kuhl [et al. ] // Cli n. Infect. Dis. – 1993. – V. 16 (Suppl 4). – Р. 234–238.Rupnik, M. Clostridium difficile infectio n: new de vel opme nts in epidemiolo gy and pat holo genesis / M. Rupnik, M.H. Wilco x, D.N. Gerdi ng // Nat. Rev. Micro biol.– 2009. – V. 7. – P. 526–536.Rupnik, M. Clostridium difficile infectio n: new de vel opme nts in epidemiolo gy and pat holo genesis / M. Rupnik, M.H. Wilco x, D.N. Gerdi ng // Nat. Rev. Micro biol.– 2009. – V. 7. – P. 526–536.Borriello , S.P. Molecular , immu nolo gical and biolo gical characterizatio n of a to xin A negati ve, to xin B positi ve strai n of Clostridium difficile / S.P. Borriello [et al. ] // Infect. Immu n. – 1992. – V. 60. – Р. 4192–4199.Borriello , S.P. Molecular , immu nolo gical and biolo gical characterizatio n of a to xin A negati ve, to xin B positi ve strai n of Clostridium difficile / S.P. Borriello [et al. ] // Infect. Immu n. – 1992. – V. 60. – Р. 4192–4199.Третьяков, В.А. Определение биологической активности токсинов Clostridium difficile в экспериментах in vivo и in vitro itroitro/ В.А. Третьяков // Журн. микроб. эпид. и иммунол. – 1998. - Т. 1, № 6. – С. 11–18.Третьяков, В.А. Определение биологической активности токсинов Clostridium difficile в экспериментах in vivo и in vitro itroitro/ В.А. Третьяков // Журн. микроб. эпид. и иммунол. – 1998. - Т. 1, № 6. – С. 11–18.Vanpouc ke, H. Evaluatio n of si x commercial assa ys for the ra pid detectio n of Clostridium difficile to xin and/or anti gen in stool specime ns / H. Vanpouc ke [et al. ] // Cli n. Micro biol. Infect. – 2001. – V. 7. – P. 55–64.Vanpouc ke, H. Evaluatio n of si x commercial assa ys for the ra pid detectio n of Clostridium difficile to xin and/or anti gen in stool specime ns / H. Vanpouc ke [et al. ] // Cli n. Micro biol. Infect. – 2001. – V. 7. – P. 55–64.Sam bol , S.P. Toxin gene anal ysis of a varia nt strai n of Clostridium difficile that causes huma n cli nical disease. / S.P. Sam bol [et al. ] // Infect Immu n. – 2000. – V. 68. – P. 5480–5487.Sam bol , S.P. Toxin gene anal ysis of a varia nt strai n of Clostridium difficile that causes huma n cli nical disease. / S.P. Sam bol [et al. ] // Infect Immu n. – 2000. – V. 68. – P. 5480–5487.Manabe, Y.C. Clostridium difficile colitis : An efficie nt cli nical approac h to dia gnosis / Y.C. Manabe [et al. ] // Ann. Inter n. Med. – 1995. – V. 123. – P. 835–840.Manabe, Y.C. Clostridium difficile colitis : An efficie nt cli nical approac h to dia gnosis / Y.C. Manabe [et al. ] // Ann. Inter n. Med. – 1995. – V. 123. – P. 835–840.Ridell , S. Evaluatio n of the Immu noCard Toxin A mem bra ne EIA for Clostridium difficile to xin A. Proceedi ngs of the 97th General Meeti ng of the America n Societ y for Micro biol ogy / S. Ridell [et al. ] // Am. Soc. Micro biol. – 1997. – Р. 165.Ridell , S. Evaluatio n of the Immu noCard Toxin A mem bra ne EIA for Clostridium difficile to xin A. Proceedi ngs of the 97th General Meeti ng of the America n Societ y for Micro biol ogy / S. Ridell [et al. ] // Am. Soc. Micro biol. – 1997. – Р. 165.Sta nec k, J.L. Multice nter evaluatio n of four met hods for Clostridium difficile detectio n: Immu noCard C. difficile , cytoto xin assa y, culture , and late x aggluti natio n. / J.L. Sta nec k [et al. ] / J. Cli n. Micro biol. – 1996. – V. 34. – P. 2718–2721.Sta nec k, J.L. Multice nter evaluatio n of four met hods for Clostridium difficile detectio n: Immu noCard C. difficile , cytoto xin assa y, culture , and late x aggluti natio n. / J.L. Sta nec k [et al. ] / J. Cli n. Micro biol. – 1996. – V. 34. – P. 2718–2721.Gerdi ng, D.N. Clostridium difficile associated diarr hea and colitis / D.N. Gerdi ng [et al. ] // Infect. Control. Hos p. Epidemiol. – 1995. – V. 16. – Р. 459–477.Gerdi ng, D.N. Clostridium difficile associated diarr hea and colitis / D.N. Gerdi ng [et al. ] // Infect. Control. Hos p. Epidemiol. – 1995. – V. 16. – Р. 459–477.Shahra badi , M.S. Late x aggluti natio n test for de tectio n of Clostridioum difficile to xin in stool sam ples / M.S. Shahra badi [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1984. – V. 20. – P. 339–3341.Shahra badi , M.S. Late x aggluti natio n test for de tectio n of Clostridioum difficile to xin in stool sam ples / M.S. Shahra badi [et al. ] // J. Cli n. Micro biol. – 1984. – V. 20. – P. 339–3341.Макриди, П.С. Частота регистрации токсигенных штаммов Clostridium difficile у детей с ОКИ / П.С. Макриди [и др.] // Журнал инфектологии. – 2012. – Т. 4, № 12. – С. 88–89.Макриди, П.С. Частота регистрации токсигенных штаммов Clostridium difficile у детей с ОКИ / П.С. Макриди [и др.] // Журнал инфектологии. – 2012. – Т. 4, № 12. – С. 88–89.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.