jofinЖурнал инфектологииJournal Infectology2072-6732IPO “АIDSSPbR"10.22625/2072-6732-2013-5-2-22-31jofin-164Research ArticleОригинальные исследованияOriginal ResearchИССЛЕДОВАНИЕ АНТИГЕН-СТИМУЛИРОВАННОЙ ПРОДУКЦИИ υ-ИНТЕРФЕРОНА EX VIVO В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ АКТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХAntigen induced production of υ-interferon ex vivo, in the peripheral blood of patients with active pulmonary tuberculosisЗагдынЗ. М.ZagdynZ. M.

старший научный сотрудник научно-методического отдела Санкт-Петербургского научно-исследовательского института фтизиопульмонологии, к.м.н.; тел +7-921-767-69-47

dinmet@mail.ruЛуцкийА. А.LutskiyA. A.

научный сотрудник отдела вирусных гепатитов и заболеваний печени Научно-исследовательского института детских инфекций, к.м.н; тел.: 8(812)234-34-16

anton.lutckii@hotmail.comЖирковА. А.ZhirkovA. A.

младший научный сотрудник отдела клинической лабораторной диагностики Научно-исследовательского института детских инфекций; тел.: 8(812)234-34-18

ant-zhirkov@yandex.ruМакаренкоО. А.MakarenkoO. A.

врач-лаборант лаборатории иммунологических и аллергологических исследований Научно-исследовательского института детских инфекций; тел.: 8(812)234-34-18

makarenko_oa@mail.ruФеррараД.FerraraD.

старший консультант, научный сотрудник отделения пульмонологии Каролинского университетского госпиталя, доцент отдела пульмонологии факультета внутренних болезней университета Перуджии, PhD, MD; тел.: +4685177526

giovanni.ferrara@ki.seАксельсон-РобертсонР.Axelsson-RobertsonR.

руководитель отдела молекулярной, онко- и цитобиологии Каролинского университета, PhD, Post Doc; тел. +46858582217

rebecca.axelsson@ki.seМегелесИ.MagalhaesI.

научный сотрудник Центра трансплантации аллогенных стволовых клеток (CAST) Каролинского университетского Госпиталя, PhD; тел.: +46858582217

isabelle.magalhaes@ki.seСкрынникН. А.SkrynnikN. A.

главный врач Противотуберкулезного диспансера № 12, к.м.н.; тел.: +7-911-227-52-81

skrinik@rambler.ruШабалинВ. Н.ShabalinV. N.

заместитель главного врача по лечебной работе Зеленохолмской противотуберкулезной больницы; тел.: +7-911-989-15-38

ДжумаеваХ. Н.DzhumaevaH. N.

заведующая отделением для больных ВИЧ/ТБ Зеленохолмской противотуберкулезной больницы; тел.: +7-905-266-08-22

МейерМ.MaeurerM.

руководитель отдела терепевтической иммунологии (TIM) факультета лабораторной медицины (LABMED) и отел молекулярной, онко- и цитобиологии Каролинского университета, Центр трансплантации аллогенных стволовых клеток (CAST) Каролинского университетского госпиталя, MD, PhD, F RCP (Лондон), профессор; тел.: +46858581623

markus.maeurer@ki.seСидоренкоС. В.SidorenkoS. V.

руководитель отдела молекулярной микробиологии и эпидемиологии Научно-исследовательского института детских инфекций, д.м.н.; профессор; тел.: 8(812)234-07-40

sidorserg@gmail.comЛобзинЮ. В.LobzinYu. V.

директор Научно-исследовательского института детских инфекций, д.м.н., профессор, академик РАМН; тел. 8(812)234-60-04

niidi@niidi.ruСанкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии, Санкт-ПетербургРоссияSaint-Petersburg Science Research Institute of Phthisiopulmonology, Saint-PetersburgRussian FederationНаучно-исследовательский институт детских инфекций ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссияScience Research Institute of Children’s Infections, Saint-PetersburgRussian FederationЦентр трансплантации аллогенных стволовых клеток, Каролинский университетский госпиталь, Стокгольм, Швеция Департамент микробиологии, опухолевой и клеточной биологии, Каролинский университет, Стокгольм, Швеция Университет Перуджии, Перуджия, Италия Отделение терапевтической иммунологии, департамента лабораторной медицины, Каролинский университет, Стокгольм, ШвецияРоссияKarolinska University Hospital, Stockholm, Sweden Department of Microbiology, Tumor and Cell Biology, Karolinska University, Stockholm, Sweden University of Perugia, Perugia, Italy Division Therapeutic Immunology, Karolinska University, Stockholm, SwedenRussian FederationЦентр трансплантации аллогенных стволовых клеток, Каролинский университетский госпиталь, Стокгольм, ШвецияРоссияKarolinska University Hospital, Stockholm, SwedenRussian FederationДепартамент микробиологии, опухолевой и клеточной биологии, Каролинский университет, Стокгольм, ШвецияРоссияDepartment of Microbiology, Tumor and Cell Biology, Karolinska University, Stockholm, SwedenRussian FederationПротивотуберкулезный диспансер № 12, Санкт-ПетербургРоссияSaint-Petersburg Regional Antituberculosis Dispensary №12, Saint-PetersburgRussian FederationЗеленохолмская туберкулезная больница, Зеленый холм, Ленинградская областьРоссияZeleniy Holm Tuberculosis hospital, Zeleniy holm, Leningrad RegionRussian FederationЦентр трансплантации аллогенных стволовых клеток, Каролинский университетский госпиталь, Стокгольм, Швеция Департамент микробиологии, опухолевой и клеточной биологии, Каролинский университет, Стокгольм, Швеция Отделение терапевтической иммунологии, департамента лабораторной медицины, Каролинский университет, Стокгольм, ШвецияРоссияKarolinska University Hospital, Stockholm, Sweden Department of Microbiology, Tumor and Cell Biology, Karolinska University, Stockholm, Sweden Division Therapeutic Immunology, Karolinska University, Stockholm, SwedenRussian Federation201315092014522231Copyright © Загдын З.М., Луцкий А.А., Жирков А.А., Макаренко О.А., Феррара Д., Аксельсон-Робертсон Р., Мегелес И., Скрынник Н.А., Шабалин В.Н., Джумаева Х.Н., Мейер М., Сидоренко С.В., Лобзин Ю.В., 20142014Загдын З.М., Луцкий А.А., Жирков А.А., Макаренко О.А., Феррара Д., Аксельсон-Робертсон Р., Мегелес И., Скрынник Н.А., Шабалин В.Н., Джумаева Х.Н., Мейер М., Сидоренко С.В., Лобзин Ю.В.Zagdyn Z.M., Lutskiy A.A., Zhirkov A.A., Makarenko O.A., Ferrara D., Axelsson-Robertson R., Magalhaes I., Skrynnik N.A., Shabalin V.N., Dzhumaeva H.N., Maeurer M., Sidorenko S.V., Lobzin Y.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.niidi.ru/jofin/article/view/164

Туберкулез является одной из наиболее серьезных проблем российского здравоохранения. Россия остается в списке из 22 стран с высокой заболеваемостью туберкулезом и на 3-м месте в мире по распространенности лекарственно-устойчивых форм заболевания. Требуется разработка как новых методов диагностики, так и эффективных мер специфической профилактики, включая новые вакцины, для создания которых необходимо знание наиболее иммуногенных антигенов Mycobacterium tuberculosis. В данной работе исследовалась продукция интерферона-гамма в цельной крови пациентов с активным туберкулезом в ответ на антиген-стимуляцию различными белками Mycobacterium tuberculosis. Результаты исследования позволили дать оценку иммуногенности ранее изученных белков (Ag85a и ESAT -6) в сравнении с недавно идентифицированными белками (Rv 2957, Rv 2958c и Rv0447) с одновременным изучением их отношений к туберкулину и антигенам различных вирусов (вирус иммунодефицита человека, цитомегаловирус, вирус Эпштейна – Барр, вирус гриппа). Белок Rv2958c, в отличие от белка ESAT T-6, показал большую иммуногенность при сравнении с туберкуэффективлином. Выраженная иммуногенность белка Rv2958c может свидетельствовать о возможно большей специфичности иммунного ответа на этот антиген у больных туберкулезом. Между тем бактериовыделение было ассоциировано с достоверно низким иммунным ответом на данный белок. Также выявлены статистические различия в иммунореактивности пациентов к различным антигенам Mycobacterium tuberculosis в зависимости от наличия или отсутствия лекарственной устойчивости возбудителя. Представляет интерес достоверно низкая иммунореактивность пациентов с лекарственно-устойчивым туберкулезом в отношении белка pp65 CMV.

Tuberculosis (TB) is one of the most significant problems in the Russian Health Care. Russia remains on the list of the 22 countries with a high TB incidence and on the third place in the world with a high prevalence of Drug Resistant TB [1]. It is urgently needed to develop new TB diagnostic methods as well as effective measures of the specific TB prevention, including a development of the novel vaccines, so we have to know better about the most immunogenic antigens of Mycobacterium Tuberculosis. We studied the Interferon-Q production in the whole blood after stimulating immune response with different proteins of Mycobacterium Tuberculosis in patients with active TB. The study results permitted us to evaluate the immunogenicity of the previously known proteins (Ag85a и ESAT-6) in comparison to the recently identified ones (Rv2957, Rv2958c и Rv0447), analyzing simultaneously their relation to tuberculin, as well as to antigens of the different viruses (Human Immunodeficiency Virus, Cytomegalovirus, Epstein-Barr Virus, Influenza Virus). Protein Rv2958c, unlike protein ESAT-6, showed the high immunogenicity in comparison to tuberculin. The expressed immunogenicity of protein Rv2958c might be indicated a possible greatest specificity of immune response to this antigen in TB patients. Meanwhile, bacillary tuberculosis was strongly associated with low immune response to this protein. Also we were found statistical differences in immune responses of patients to the different Mycobacterium Tuberculosis antigens depending on the drug sensitivity. In addition it was interesting to know about a significantly low immune response of patients with Drug Resistant TB to protein pp65 CMV.

туберкулезлекарственно-устойчивый туберкулезпродукция интерферона гаммаспецифический иммунный ответтуберкулез и вирусные инфекцииtuberculosisdrug resistant tuberculosisY-interferon productionspecific immune responsetuberculosis and virus co-infectionsReferencesWHO Global tuberculosis report 2012. // http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/index.htmlWHO Global tuberculosis report 2012. // http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/index.htmlCagatay, T. TNF-alpha antagonist therapy modify the tuberculin skin test response. / T. Cagatay [et al.] // Rheumatol Int. – 2011. – V. 31, № 9. – P. 1147–1151.Cagatay, T. TNF-alpha antagonist therapy modify the tuberculin skin test response. / T. Cagatay [et al.] // Rheumatol Int. – 2011. – V. 31, № 9. – P. 1147–1151.Dewan, P.K. Low sensitivity of a whole-blood interferon-gamma release assay for detection of active tuberculosis. / P.K. Dewan, J. Grinsdale, L.M. Kawamura. // Clin. Infect. Dis. – 2007. – V. 44, № 1. – P. 69–73.Dewan, P.K. Low sensitivity of a whole-blood interferon-gamma release assay for detection of active tuberculosis. / P.K. Dewan, J. Grinsdale, L.M. Kawamura. // Clin. Infect. Dis. – 2007. – V. 44, № 1. – P. 69–73.Hammond, A.S. Mycobacterium tuberculosis genome-wide screen exposes multiple CD8 T cell epitopes. / A.S. Hammond [et al.] // Clin. Exp. Immunol. – 2005. – V. 140, № 1. – P. 109–116.Hammond, A.S. Mycobacterium tuberculosis genome-wide screen exposes multiple CD8 T cell epitopes. / A.S. Hammond [et al.] // Clin. Exp. Immunol. – 2005. – V. 140, № 1. – P. 109–116.Ahmed, R.K. Pattern recognition and cellular immune responses to novel Mycobacterium tuberculosis-antigens in individuals from Belarus / R.K. Ahmed [et al.] // BMC Infect Dis. – 2012. – V. 12. – P. 41.Ahmed, R.K. Pattern recognition and cellular immune responses to novel Mycobacterium tuberculosis-antigens in individuals from Belarus / R.K. Ahmed [et al.] // BMC Infect Dis. – 2012. – V. 12. – P. 41.De Groote, D. Direct stimulation of cytokines (IL-1 beta, TNF-alpha, IL-6, IL-2, IFN-gamma and GM-CSF) in whole blood. I. Comparison with isolated PBMC stimulation / D. De Groote [et al.] // Cytokine. – 1992. – V. 4, № 3. – P. 239–248.De Groote, D. Direct stimulation of cytokines (IL-1 beta, TNF-alpha, IL-6, IL-2, IFN-gamma and GM-CSF) in whole blood. I. Comparison with isolated PBMC stimulation / D. De Groote [et al.] // Cytokine. – 1992. – V. 4, № 3. – P. 239–248.Kirchner, H. A whole-blood technique for testing production of human interferon by leukocytes / H. Kirchner, C. Kleinicke, W. Digel // J. Immunol. Methods. – 1982. – V. 48, № 2. – P. 213–219.Kirchner, H. A whole-blood technique for testing production of human interferon by leukocytes / H. Kirchner, C. Kleinicke, W. Digel // J. Immunol. Methods. – 1982. – V. 48, № 2. – P. 213–219.Kiran, B. Can immune parameters be used as predictors to distinguish between pulmonary multidrug-resistant and drug-sensitive tuberculosis? / B. Kiran [et al.] // Arch. Med. Sci. – 2010. – V. 6, № 1. – P. 77–82.Kiran, B. Can immune parameters be used as predictors to distinguish between pulmonary multidrug-resistant and drug-sensitive tuberculosis? / B. Kiran [et al.] // Arch. Med. Sci. – 2010. – V. 6, № 1. – P. 77–82.Gaseitsiwe, S. Pattern recognition in pulmonary tuberculosis defined by high content peptide microarray chip analysis representing 61 proteins from M. tuberculosis / S. Gaseitsiwe [et al.] // PLoS One. – 2008. – V. 3, № 12. – P. e3840.Gaseitsiwe, S. Pattern recognition in pulmonary tuberculosis defined by high content peptide microarray chip analysis representing 61 proteins from M. tuberculosis / S. Gaseitsiwe [et al.] // PLoS One. – 2008. – V. 3, № 12. – P. e3840.Yuan, Y. The biosynthesis of mycolic acids in Mycobacterium tuberculosis. Enzymatic methyl(ene) transfer to acyl carrier protein bound meromycolic acid in vitro. / Y. Yuan [et al.] // J. Biol. Chem. – 1998. – V. 273, № 33. – P. 21282–21290.Yuan, Y. The biosynthesis of mycolic acids in Mycobacterium tuberculosis. Enzymatic methyl(ene) transfer to acyl carrier protein bound meromycolic acid in vitro. / Y. Yuan [et al.] // J. Biol. Chem. – 1998. – V. 273, № 33. – P. 21282–21290.Perez, E. Characterization of three glycosyltransferases involved in the biosynthesis of the phenolic glycolipid antigens from the Mycobacterium tuberculosis complex / E. Perez [et al.] // J. Biol. Chem. – 2004. – V. 279, № 41. – P. 42574–42583.Perez, E. Characterization of three glycosyltransferases involved in the biosynthesis of the phenolic glycolipid antigens from the Mycobacterium tuberculosis complex / E. Perez [et al.] // J. Biol. Chem. – 2004. – V. 279, № 41. – P. 42574–42583.Neill, M.A. The effect of phenolic glycolipid-1 from Mycobacterium leprae on the antimicrobial activity of human macrophages. / M.A. Neill, S.J. Klebanoff // J. Exp. Med. – 1988. – V. 167, № 1. – P. 30–42.Neill, M.A. The effect of phenolic glycolipid-1 from Mycobacterium leprae on the antimicrobial activity of human macrophages. / M.A. Neill, S.J. Klebanoff // J. Exp. Med. – 1988. – V. 167, № 1. – P. 30–42.Belisle, J.T. Role of the major antigen of Mycobacterium tuberculosis in cell wall biogenesis / J.T. Belisle [et al.] // Science. – 1997. – V. 276, № 5317. – P. 1420–1422.Belisle, J.T. Role of the major antigen of Mycobacterium tuberculosis in cell wall biogenesis / J.T. Belisle [et al.] // Science. – 1997. – V. 276, № 5317. – P. 1420–1422.Hoft, D.F. A recombinant adenovirus expressing immunodominant TB antigens can significantly enhance BCG-induced human immunity / D.F. Hoft [et al.] // Vaccine. – 2012. – V. 30, № 12. – P. 2098–2108.Hoft, D.F. A recombinant adenovirus expressing immunodominant TB antigens can significantly enhance BCG-induced human immunity / D.F. Hoft [et al.] // Vaccine. – 2012. – V. 30, № 12. – P. 2098–2108.Sorensen, A.L. Purification and characterization of a low-molecular-mass T-cell antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis / A.L. Sorensen [et al.] // Infect Immun. – 1995. – V. 63, № 5. – P. 1710–1717.Sorensen, A.L. Purification and characterization of a low-molecular-mass T-cell antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis / A.L. Sorensen [et al.] // Infect Immun. – 1995. – V. 63, № 5. – P. 1710–1717.Derrick, S.C. The ESAT6 protein of Mycobacterium tuberculosis induces apoptosis of macrophages by activating caspase expression. / S.C. Derrick, S.L. Morris // Cell Microbiol. – 2007. – V. 9, № 6. – P. 1547–1555.Derrick, S.C. The ESAT6 protein of Mycobacterium tuberculosis induces apoptosis of macrophages by activating caspase expression. / S.C. Derrick, S.L. Morris // Cell Microbiol. – 2007. – V. 9, № 6. – P. 1547–1555.Levitskaya, J. Inhibition of antigen processing by the internal repeat region of the Epstein-Barr virus nuclear antigen-1 / J. Levitskaya [et al.] // Nature. – 1995. – V. 375, № 6533. – P. 685–688.Levitskaya, J. Inhibition of antigen processing by the internal repeat region of the Epstein-Barr virus nuclear antigen-1 / J. Levitskaya [et al.] // Nature. – 1995. – V. 375, № 6533. – P. 685–688.Sha, B. Structure of a bifunctional membrane-RNA binding protein, influenza virus matrix protein M1 / B. Sha, M. Luo. // Nat. Struct. Biol. – 1997. – V. 4, № 3. – P. 239–244.Sha, B. Structure of a bifunctional membrane-RNA binding protein, influenza virus matrix protein M1 / B. Sha, M. Luo. // Nat. Struct. Biol. – 1997. – V. 4, № 3. – P. 239–244.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.