jofinЖурнал инфектологииJournal Infectology2072-6732IPO “АIDSSPbR"10.22625/2072-6732-2022-14-2-139-145jofin-1362Research ArticleОригинальные исследованияOriginal ResearchОсобенности реализации апоптоза CD4+ лимфоцитов у детей, больных криптоспоридиозомFeatures of CD4+ lymphocytes apoptosis in children with cryptosporidiosisСтариковаЕ. Г.StarikovaE. G.

Старикова Елена Григорьевна – профессор кафедры биологии и генетики; д.м.н.; тел.: 8(3811)90-11-01 доб. 16-93

Томск

Tomsk

elena.g.starikova@yandex.ruВоронковаО. В.VoronkovaO. V.

Воронкова Ольга Владимировна – профессор кафедры биологии и генетики; д.м.н., доцент; тел.: 8 (3811)90-11-01 доб. 19-45

Томск

Tomsk

voronkova-ov@yandex.ruШубинаН. И.ShubinaN. I.

Шубина Наталья Ивановна – врач-инфекционист; тел.: 8(3822)90-73-62

Томск

Tomsk

natalya.i.shubina@gmail.comСтариковЮ. В.StarikovYu. V.

Стариков Юрий Витальевич – врач клинической лабораторной диагностики; к.м.н.; тел: +7-961-887-53-96

Томск

Tomsk

to-yuri@yandex.ruСибирский государственный медицинский университетРоссияSiberian State Medical UniversityRussian FederationМедицинская санитарная часть № 2РоссияMedical Unit № 2Russian FederationТомская областная клиническая больницаРоссияTomsk Regional Clinical HospitalRussian Federation202214072022142138144Copyright © Старикова Е.Г., Воронкова О.В., Шубина Н.И., Стариков Ю.В., 20222022Старикова Е.Г., Воронкова О.В., Шубина Н.И., Стариков Ю.В.Starikova E.G., Voronkova O.V., Shubina N.I., Starikov Y.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.niidi.ru/jofin/article/view/1362Цель

Цель: выявление особенностей апоптоза CD4+ лимфоцитов при криптоспоридиозе у детей.

Материалы и методы

Материалы и методы: кал для выявления криптоспоридий и венозная кровь для изучения апоптоза лимфоцитов. Мононуклеарные лейкоциты выделяли из цельной венозной крови и культивировали в полной питательной среде. Клетки инкубировали в течение 24 ч с индукторами рецепторного и митохондриального путей апоптоза – TNFα и дексаметозоном.

Результаты

Результаты: криптоспоридии были обнаружены в 35% случаев острой кишечной инфекции у детей. Количество лимфоцитов с цитофлюриметрическими признаками апоптоза в группе криптоспоридиоз-позитивных пациентов не отличалось от такового у пациентов без криптоспоридиоза (р=0,421). Не было установлено межгрупповых различий в количестве CD4+лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности Fas-рецептор (р=0,462). В культурах, инкубируемых в присутствии дексаметозона, было зарегистрировано снижение количества апоптотически измененных CD4+ лимфоцитов только в группе криптоспоридиозпозитивных пациентов (р=0,028).

Заключение

Заключение: в исследовании было показано, что при криптоспоридиозе изменяется чувствительность CD4+ клеток к индукции митохондриального пути апоптоза в пользу замедления указанного варианта клеточной гибели.

The aim of this study was to identify the features of CD4+ lymphocytes apoptosis in children with cryptosporidiosis. Feces for the detection of cryptosporidium and venous blood for the study of lymphocytes apoptosis were the material of the study. Mononuclear leukocytes were isolated from venous whole blood and cultured in a complete culture medium. Cells were incubated for 24 hours with inducers of the receptor (TNFα) and mitochondrial pathways of apoptosis (dexamethasone).

Cryptosporidia have been found in 35% of acute intestinal infections in children. The number of lymphocytes with cytoflurimetric signs of apoptosis in the group of cryptosporidiosis-positive patients did not differ from that in patients without cryptosporidiosis (p=0.421). There were no intergroup differences in the number of CD4+ lymphocytes expressing the Fas receptor on their surface (p=0.462). In cultures incubated in the presence of dexamethasone, a decrease in the number of apoptotically altered CD4+ lymphocytes was registered only in the group of cryptosporidiosispositive patients (p=0.028).

The study showed that in cryptosporidiosis, the sensitivity of CD4+ cells to the induction of the mitochondrial pathway of apoptosis changes in favor of slowing down this variant of cell death.

криптоспоридиозапоптозмитоходриальный путь апоптозарецепторный путь апоптозаcryptosporidiosisapoptosismitochondrial pathway of apoptosisreceptor pathway of apoptosisИсследование выполнено на средства гранта Президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых (договор №14W01.17.3455-МД).ReferencesСтарикова, Е.Г. Криптоспоридии и макроорганизм: факторы, влияющие на развитие криптоспоридиоза / Е.Г. Старикова [и др.] // Вестник РАМН. – 2017. – Т.72, № 6. С. 420–427. – doi: 10.15690/vramn888Starikova EG, Voronkova OV, Kovshirina YuV, et al. Cryptosporidia and macroorganism: factors that influence on the development of cryptosporidiosis. Vestnik RAMN. 2017; 72(6): 420-427. (in Russ). doi: 10.15690/vramn888Sabir, M.J., Low, R., Hall, N. et al. A Bioinformatics Approach to Identifying Potential Biomarkers for Cryptosporidium parvum: A Coccidian Parasite Associated with Fetal Diarrhea / M.J. Sabir // Vaccines (Basel). – 2021. – Vol.9. – P. 1427-1432. doi: 10.3390/vaccines9121427Sabir, M.J., Low, R., Hall, N. et al. A Bioinformatics Approach to Identifying Potential Biomarkers for Cryptosporidium parvum: A Coccidian Parasite Associated with Fetal Diarrhea / M.J. Sabir // Vaccines (Basel). – 2021. – Vol.9. – P. 1427-1432. doi: 10.3390/vaccines9121427Zhan Y, Carrington EM, Zhang Y, et al. Life and Death of Activated T Cells: How Are They Different from Naïve T Cells? Front. Immunol. 2017; 8:1809. doi: 10.3389/fimmu.2017.01809Zhan Y, Carrington EM, Zhang Y, et al. Life and Death of Activated T Cells: How Are They Different from Naïve T Cells? Front. Immunol. 2017; 8:1809. doi: 10.3389/fimmu.2017.01809Silva GK, Costa RS, Silveira TN, et al Apoptosis-Associated Speck-like Protein Containing a Caspase Recruitment Domain Inflammasomes Mediate IL-1 Response and Host Resistance to Trypanosoma cruzi Infection. The Journal of Immunology. 2013; 191(6): P 3373 -3383. doi:10.4049/jimmunol.1203293Silva GK, Costa RS, Silveira TN, et al Apoptosis-Associated Speck-like Protein Containing a Caspase Recruitment Domain Inflammasomes Mediate IL-1 Response and Host Resistance to Trypanosoma cruzi Infection. The Journal of Immunology. 2013; 191(6): P 3373 -3383. doi:10.4049/jimmunol.1203293Mammari N, Halabi MA, Yaacoub S. Toxoplasma gondii Modulates the Host Cell Responses: An Overview of Apoptosis Pathways. BioMed Research International. 2019; (11):1-10. doi:10.1155/2019/6152489Mammari N, Halabi MA, Yaacoub S. Toxoplasma gondii Modulates the Host Cell Responses: An Overview of Apoptosis Pathways. BioMed Research International. 2019; (11):1-10. doi:10.1155/2019/6152489Vasconcelos, J.R., Bruna-Romero, O., Araujo, A.F., et al. Pathogen-induced proapoptotic phenotype and high CD95 (Fas) expression accompanya suboptimal CD8+T-cellresponse: reversal by adenoviral vaccine / J.R. Vasconcelos// PLoS Pathog. – 2012. Vol.8. – P.26-34. doi:10.1371/journal.ppat.1002699.Vasconcelos, J.R., Bruna-Romero, O., Araujo, A.F., et al. Pathogen-induced proapoptotic phenotype and high CD95 (Fas) expression accompanya suboptimal CD8+T-cellresponse: reversal by adenoviral vaccine / J.R. Vasconcelos// PLoS Pathog. – 2012. Vol.8. – P.26-34. doi:10.1371/journal.ppat.1002699.Старикова, Е.Г. Распространенность и клинико-лабораторные особенности криптоспоридиоза у детей в возрасте до 5 лет: одномоментное исследование госпитальных случаев острой кишечной инфекции / Е.Г. Старикова [и др.] // Вопросы современной педиатрии. – 2018. – Т. 17, № 4. С. 316-322. – doi: 10.15690/vsp.v17i4.1925Starikova E.G., SHubina N.I., Voronkova O.V., Kovshirina YU.V., YArovoj N.D. / Rasprostranennost’ i kliniko-laboratornye osobennosti kriptosporidioza u detej v vozraste do 5 let: odnomomentnoe issledovanie gospital’nyh sluchaev ostroj kishechnoj infekcii // Voprosy sovremennoj pediatrii. – 2018. – T.17. - № 4. - S.316-322. doi: 10.15690/vsp.v17i4.1925Citro, A., Barnaba, V., Martini, H. From T cell apoptosis to chronic immune activation in inflammatory diseases / A. Citro // Int Arch Allergy Immunol. – 2014. – Vol.164. – P.140-146. doi: 10.1159/000363385.Citro, A., Barnaba, V., Martini, H. From T cell apoptosis to chronic immune activation in inflammatory diseases / A. Citro // Int Arch Allergy Immunol. – 2014. – Vol.164. – P.140-146. doi: 10.1159/000363385.Oliveira, C.F., Manzoni-de-Almeida, D., Mello, P.S., et al. Characterization of chronic cutaneous lesions from TNF-receptor1-deficient mice infected by Leishmania major / C.F. Oliveira// Clin Dev Immunol. – 2012: 865708. doi: 10.1155/2012/865708.Oliveira, C.F., Manzoni-de-Almeida, D., Mello, P.S., et al. Characterization of chronic cutaneous lesions from TNF-receptor1-deficient mice infected by Leishmania major / C.F. Oliveira// Clin Dev Immunol. – 2012: 865708. doi: 10.1155/2012/865708.Cardoso MS, Reis-Cunha JL, Bartholomeu DC. Evasion of the Immune Response by Trypanosoma cruzi during acute infection. Front. Immunol. 2016; 6:659. doi: 10.3389/fimmu.2015.00659Cardoso MS, Reis-Cunha JL, Bartholomeu DC. Evasion of the Immune Response by Trypanosoma cruzi during acute infection. Front. Immunol. 2016; 6:659. doi: 10.3389/fimmu.2015.00659Song, X., Traub, B., Shi, J., Kornmann, M. Possible Roles of Interleukin-4 and -13 and Their Receptors in Gastric and Colon Cancer / X. Song// Int J Mol Sci. – 2021. – Vol.22. – P. 727 -735. doi: 10.3390/ijms22020727Song, X., Traub, B., Shi, J., Kornmann, M. Possible Roles of Interleukin-4 and -13 and Their Receptors in Gastric and Colon Cancer / X. Song// Int J Mol Sci. – 2021. – Vol.22. – P. 727 -735. doi: 10.3390/ijms22020727Lupi, L.A., Delella, F.K., Cucielo, M.S. et al. P-MAPA and Interleukin-12 Reduce Cell Migration/Invasion and Attenuate the Toll-Like Receptor-Mediated Inflammatory Response in Ovarian Cancer SKOV-3 Cells: A Preliminary Study / L.A. Lupi// Molecules. – 2020. – Vol.25. P. 5 – 14. doi: 10.3390/molecules25010005Lupi, L.A., Delella, F.K., Cucielo, M.S. et al. P-MAPA and Interleukin-12 Reduce Cell Migration/Invasion and Attenuate the Toll-Like Receptor-Mediated Inflammatory Response in Ovarian Cancer SKOV-3 Cells: A Preliminary Study / L.A. Lupi// Molecules. – 2020. – Vol.25. P. 5 – 14. doi: 10.3390/molecules25010005Magerus-Chatinet, A., Rieux-Laucat, F. In Vitro Evaluation of the Apoptosis Function in Human Activated T Cells / A. Magerus-Chatinet// Methods Mol Biol. – 2017. – Vol.1557. P. 33-40. doi: 10.1007/978-1-4939-6780-3_4.Magerus-Chatinet, A., Rieux-Laucat, F. In Vitro Evaluation of the Apoptosis Function in Human Activated T Cells / A. Magerus-Chatinet// Methods Mol Biol. – 2017. – Vol.1557. P. 33-40. doi: 10.1007/978-1-4939-6780-3_4.Pagan, A.J., Peters, N.C., Debraban,t A., et al. Tracking antigen-specific CD4(+) T cells throughout the course of chronic Leishmania major infection in resistant mice / A.J. Pagan // Eur J Immunol. – 2012. – Vol.43. – P.427–438. doi: 10.1002/eji.201242715.Pagan, A.J., Peters, N.C., Debraban,t A., et al. Tracking antigen-specific CD4(+) T cells throughout the course of chronic Leishmania major infection in resistant mice / A.J. Pagan // Eur J Immunol. – 2012. – Vol.43. – P.427–438. doi: 10.1002/eji.201242715.Herold, M. J., Stuchbery, R., Mérino, D., Willson, T., Strasser, A., Hildeman, D., & Bouillet, P. Impact of conditional deletion of the pro-apoptotic BCL-2 family member BIM in mice. Cell Death & Disease. 2014; 5(10), e1446–e1446. https://doi.org/10.1038/cddis.2014.409Herold, M. J., Stuchbery, R., Mérino, D., Willson, T., Strasser, A., Hildeman, D., & Bouillet, P. Impact of conditional deletion of the pro-apoptotic BCL-2 family member BIM in mice. Cell Death & Disease. 2014; 5(10), e1446–e1446. https://doi.org/10.1038/cddis.2014.409

The authors declare that there are no conflicts of interest present.