jofinЖурнал инфектологииJournal Infectology2072-6732IPO “АIDSSPbR"10.22625/2072-6732-2020-12-5-101-106jofin-1150Research ArticleОригинальные исследованияOriginal ResearchЧастота выявления антител к белку core+1 вируса гепатита с у «наивных» пациентов С хроническим вирусным гепатитом С в зависимости от стадии фиброза печени и субтипа вируса гепатита СDetection rate of specific antibodies to the HCV CORE+1 protein in “naive” cronically HCV-infected patients in depends on the stage of liver fibrosis and the HCV subtypeЛичнаяЕ. В.LichnayaE. V.

младший научный сотрудник лаборатории молекулярной эпидемиологии и эволюционной генетики,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

evlichnaia@gmail.comБелопольскаяМ. АBelopolskayaM. A.

врач-инфекционист;

научный сотрудник отдела экологической физиологии, к.м.н.,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

belopolskaya.maria@yahoo.comВербовВ. Н.VerbovV. N.

заведующий отделом новых технологий, к.х.н.,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

pasteurdnt@yandex.ruЯковлевА. А.YakovlevA. A.

заведующий кафедрой инфекционных болезней, эпидемиологии и дерматовенерологии медицинского факультета, д.м.н., профессор,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

aay28@yandex.ruДмитриевА. В.DmitrievA. V.

директор Института;

профессор кафедры фундаментальных проблем медицины и медицинских технологий факультета стоматологии и медицинских технологий,  д.б.н., профессор,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

admitriev10@yandex.ruКалининаО. В.KalininaO. V.

ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной эпидемиологии и эволюционной генетики;

профессор кафедры лабораторной медицины и генетики, декан факультета биомедицинских наук, д.б.н.,

Санкт-Петербург

Saint-Petersburg

olgakalinina@mail.ruСанкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. ПастераРоссияSaint-Petersburg Research Institute of Epidemiology and Microbiology named after PasteurRussian FederationКлиническая инфекционная больница им. С.П. Боткина; Институт экспериментальной медициныРоссияClinical Infectious Diseases Hospital named after S.P. Botkin; Institute of Experimental MedicineRussian FederationСанкт-Петербургский государственный университетРоссияSaint-Petersburg State UniversityRussian FederationИнститут экспериментальной медицины; Санкт-Петербургский государственный университетРоссияInstitute of Experimental Medicine; Saint-Petersburg State UniversityRussian FederationСанкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера; Национальный медицинский исследовательский центр им. В.А. АлмазоваРоссияSaint-Petersburg Research Institute of Epidemiology and Microbiology named after Pasteur; National Medical Research Centre named after V.A. AlmazovRussian Federation202020012021125101106Copyright © Личная Е.В., Белопольская М.А., Вербов В.Н., Яковлев А.А., Дмитриев А.В., Калинина О.В., 20212021Личная Е.В., Белопольская М.А., Вербов В.Н., Яковлев А.А., Дмитриев А.В., Калинина О.В.Lichnaya E.V., Belopolskaya M.A., Verbov V.N., Yakovlev A.A., Dmitriev A.V., Kalinina O.V.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.niidi.ru/jofin/article/view/1150Цель

Цель: изучить распространенность анти-core+1 у «наивных» больных хроническим гепатитом С, инфицированных субтипами вируса гепатита С 1b и 3а, с различной стадией фиброза.

Материалы и методы

Материалы и методы: исследованы образцы сыворотки крови, полученные от 86 пациентов с ХГС (37 мужчин и 49 женщин) в возрасте от 24 до 80 лет (средний возраст 50,7±2,7), наблюдавшихся в поликлиническом отделении Клинической инфекционной больницы им. С.П. Боткина в 2017 г. Лабораторное обследование пациентов включало определение в крови активности АЛТ и уровня билирубина. Степень выраженности фиброза ткани печени по шкале METAVIR была оценена методом транзиентной эластографии (ТЭ) на аппарате Fibroscan (Echosens, Франция) у 53 пациентов. Наличие антител к белку core+1 в образцах сыворотки крови определяли непрямым методом ИФА «in-house» с использованием синтетических пептидов F10 и F13, содержащих антигенные детерминанты core+1 белка вируса гепатита С субтипов 1b и 3а соответственно.

Результаты

Результаты: антитела к белку core+1 ВГС были выявлены у 27 (31,4%) обследованных. Было показано, что частота выявления анти-core+1 не зависит от субтипа вируса гепатита С. Статистически достоверных отличий между наличием анти-core+1 и уровнями АЛТ и общего билирубина не установлено. Анти-core+1 определялись у пациентов со всеми стадиями фиброза, однако частота обнаружения анти-core+1 была достоверно выше у пациентов с фиброзом стадии F4 по сравнению с пациентами, у которых фиброз в печени отсутствовал. 

Заключение

Заключение: полученные результаты позволяют предположить возможную роль белка core+1 в развитии фиброза. При естественном течении ВГС-инфекции определение анти-core+1 можно рассматривать как прогностический маркер прогрессирования фиброза в ткани печени. 

Objective

Objective: The goal of this study was to examine the prevalence of anti-core+1 in “naive” patients with chronic hepatitis C and different stages of liver fibrosis infected by HCV subtypes 1b and 3a.

Materials and methods

Materials and methods: A total of 86 “naive” patients (37 men and 49 women) with CHC observed in the Botkin infectious disease hospital in 2017, were included in this study. The average age was 50,7±2,7. Laboratory tests included ALT and bilirubin. In 53 patients, the fibrosis stage in the liver tissue was evaluated by the TE method using Fibroscan (Echosens, France). The presence of antibodies to the core+1 protein in blood serum samples was determined by the “inhouse” indirect ELISA method using synthetic peptides F10 and F13, which amino acid sequences correspond to the antigenic determinants of core+1 protein of the HCV subtypes 1b and 3a, respectively.

Results

Results: In total, anti-core + 1 were detected in 27 (31,4%) subjects. It has been shown that the detection rate of anticore+1 does not depend on the HCV subtype. The study has indicated no statistically significant dependence between the presence of anti-core+1 and biochemical activity es of the infectious process (ALT, bilirubin). Anti-core+1 were detected in patients with all stages of fibrosis, however, the detection rate of anti-core+1 was statistically higher in patients with stage F4 fibrosis than in patients without liver fibrosis.

Conclusion

Conclusion: The obtained results suggest a possible role of the core+1 protein in the development of fibrosis. In the natural course of HCV infection, the detection of anti-core+1 can be considered as a prognostic marker for the progression of fibrosis in the liver tissue.

гепатит Свирус гепатита Схронический вирусный гепатит Сбелок core+1синтетический пептидиммуноферментный анализhepatitis CHCVchronic hepatitis Ccore+1 proteinsynthetic peptideELISAReferencesAjorloo M, Bamdad T, Hashempour T, et al. Detection of specific antibodies to HCV-ARF/CORE+1 protein in cirrhotic and noncirrhotic patients with hepatitis C: a possible association with progressive fibrosis. Arch Iran Med 2015;18:304-307Ajorloo M, Bamdad T, Hashempour T, et al. Detection of specific antibodies to HCV-ARF/CORE+1 protein in cirrhotic and noncirrhotic patients with hepatitis C: a possible association with progressive fibrosis. Arch Iran Med 2015;18:304-307Basu, A., Steele, R., Ray, R. & Ray, R. B. (2004). Functional properties of a 16 kDa protein translated from an alternative open reading frame of the core-encoding genomic region of hepatitis C virus. J Gen Virol 85, 2299–2306.Basu, A., Steele, R., Ray, R. & Ray, R. B. (2004). Functional properties of a 16 kDa protein translated from an alternative open reading frame of the core-encoding genomic region of hepatitis C virus. J Gen Virol 85, 2299–2306.Borgia S. M. et al. (2018) ‘Identification of a Novel Hepatitis C Virus Genotype from Punjab, India–Expanding Classification of Hepatitis C Virus into 8 Genotypes’, The Journal of Infectious Diseases, 218: 1722–9.Borgia S. M. et al. (2018) ‘Identification of a Novel Hepatitis C Virus Genotype from Punjab, India–Expanding Classification of Hepatitis C Virus into 8 Genotypes’, The Journal of Infectious Diseases, 218: 1722–9.Dalagiorgou G., Vassilaki N., Foka P., Boumlic A., Kakkanas A., Kochlios E. et al. High levels of HCV core+1 antibodies in HCV patients with hepatocellular carcinoma. J. Gen. Virol. 2011; 92 (6): 1343–51.Dalagiorgou G., Vassilaki N., Foka P., Boumlic A., Kakkanas A., Kochlios E. et al. High levels of HCV core+1 antibodies in HCV patients with hepatocellular carcinoma. J. Gen. Virol. 2011; 92 (6): 1343–51.Fiorucci, M., Boulant, S., Fournillier, A., Abraham, J. D., Lavergne, J. P., Paranhos-Baccala, G., Inchauspe ´, G. & Bain, C. (2007). Expression of the alternative reading frame protein of hepatitis C virus induces cytokines involved in hepatic injuries. Gen Virol 88, 1149–1162.Fiorucci, M., Boulant, S., Fournillier, A., Abraham, J. D., Lavergne, J. P., Paranhos-Baccala, G., Inchauspe ´, G. & Bain, C. (2007). Expression of the alternative reading frame protein of hepatitis C virus induces cytokines involved in hepatic injuries. J Gen Virol 88, 1149–1162.Kassela K, Karakasiliotis I, Charpantidis S, et al. High prevalence of antibodies to core+1/ARF protein in HCVinfected patients with advanced cirrhosis. J Gen Virol 2017; 98:1713-1719.Kassela K, Karakasiliotis I, Charpantidis S, et al. High prevalence of antibodies to core+1/ARF protein in HCV-infected patients with advanced cirrhosis. J Gen Virol 2017; 98:1713-1719.Mavromara P., Dalagiorgou G., Vassilaki N., Foka P., Boumlic A., Kakkanas A. et al. High levels of HCV core+1 antibodies in HCV patients with hepatocellular carcinoma. J. Gen .Vir. 2011; 92: 1343-51.Mavromara P., Dalagiorgou G., Vassilaki N., Foka P., Boumlic A., Kakkanas A. et al. High levels of HCV core+1 antibodies in HCV patients with hepatocellular carcinoma. J. Gen .Vir. 2011; 92: 1343-51.Mylopoulou, Theodora et al. “Relationship between antibodies to hepatitis C virus core+1 protein and treatment outcome.” Annals of gastroenterology vol. 31,5 (2018): 593-597. doi:10.20524/aog.2018.0290Mylopoulou, Theodora et al. “Relationship between antibodies to hepatitis C virus core+1 protein and treatment outcome.” Annals of gastroenterology vol. 31,5 (2018): 593-597. doi:10.20524/aog.2018.0290Qureshi, H., Qazi, R., Hamid, S., & Qureshi, S. A. (2011). Identification of immunogenic regions within the alternative reading frame protein of hepatitis C virus (genotype 3). European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases, 30(9), 1075–1083. doi:10.1007/s10096-011-1194-1Qureshi, H., Qazi, R., Hamid, S., & Qureshi, S. A. (2011). Identification of immunogenic regions within the alternative reading frame protein of hepatitis C virus (genotype 3). European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases, 30(9), 1075–1083. doi:10.1007/s10096-011-1194-1Shehat, M. G., Bahey-El-Din, M., Kassem, M. A., Farghaly, F. A., Abdul-Rahman, M. H., &Fanaki, N. H. (2015). Recombinant expression of the alternate reading frame protein (ARFP) of hepatitis C virus genotype 4a (HCV-4a) and detection of ARFP and anti-ARFP antibodies in HCV-infected patients. Archives of Virology, 160(8), 1939–1952. doi:10.1007/s00705-015-2465-4Shehat, M. G., Bahey-El-Din, M., Kassem, M. A., Farghaly, F. A., Abdul-Rahman, M. H., &Fanaki, N. H. (2015). Recombinant expression of the alternate reading frame protein (ARFP) of hepatitis C virus genotype 4a (HCV-4a) and detection of ARFP and anti-ARFP antibodies in HCV-infected patients. Archives of Virology, 160(8), 1939–1952. doi:10.1007/s00705-015-2465-4Tsao, M. L., Chao, C. H. & Yeh, C. T. (2006). Interaction of hepatitis C virus F protein with prefoldin 2 perturbs tubulin cytoskeleton organization. Biochem Biophys Res Commun 348, 271–277.Tsao, M. L., Chao, C. H. & Yeh, C. T. (2006). Interaction of hepatitis C virus F protein with prefoldin 2 perturbs tubulin cytoskeleton organization. Biochem Biophys Res Commun 348, 271–277.Vassilaki N, Mavromara P. The HCV ARFP/F/core+1 protein: production and functional analysis of an unconventional viral product. IUBMB Life 2009; 61:739-752Vassilaki N, Mavromara P. The HCV ARFP/F/core+1 protein: production and functional analysis of an unconventional viral product. IUBMB Life 2009; 61:739-752Vassilaki N., Mavromara P. Two alternative translation mechanisms are responsible for the expression of the HCV ARFP/F/core+1 coding open reading frame. J. Biol. Chem. 2003; 278: 40503–13.Vassilaki N., Mavromara P. Two alternative translation mechanisms are responsible for the expression of the HCV ARFP/F/core+1 coding open reading frame. J. Biol. Chem. 2003; 278: 40503–13.Welzel T. M. et al. (2017) ‘Global Epidemiology of HCV Subtypes and Resistance-Associated Substitutions Evaluated by Sequencing-Based Subtype Analyses’, Journal of Hepatology, 67: 224–36.Welzel T. M. et al. (2017) ‘Global Epidemiology of HCV Subtypes and Resistance-Associated Substitutions Evaluated by Sequencing-Based Subtype Analyses’, Journal of Hepatology, 67: 224–36.Wu, W. B., Shao, S. W., Zhao, L. J., Luan, J., Cao, J., Gao, J., Zhu, S. Y. & Qi, Z. T. (2007). Hepatitis C virus F protein upregulates c-myc and down-regulates p53 in human hepatoma HepG2 cells. Intervirology 50, 341–346.Wu, W. B., Shao, S. W., Zhao, L. J., Luan, J., Cao, J., Gao, J., Zhu, S. Y. & Qi, Z. T. (2007). Hepatitis C virus F protein upregulates c-myc and down-regulates p53 in human hepatoma HepG2 cells. Intervirology 50, 341–346.Калинина, О.В. Структурно-функциональная организация генома и жизненный цикл вируса гепатита С / О.В. Калинина, А.В. Дмитриев // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. –2015. – № 2. – С. 9–12.Kalinina O.V., Dmitriev A.V. Structural and functional genome organization and life cycle of hepatitis C virus //Mol.Gen.Microbiol.Virol.2015.Vol.30.№2.P.64–70 (in Russian).Личная, Е.В. Определение антител к белку F вируса гепатита С методом иммуноферментного анализа с использованием синтетического пептида / Е.В. Личная [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. – 2018. – № 63(3): DOI: http://dx.doi.org/10.18821/08692084-2018-63-3-183-186Lichnaia E.V., Klimashevskaya S.V., Obryadina A.P., Verbov V.N., Belopolskaya M.A., Esaulenko E.V., Kalinina O.V. The detection of antibodies to the HCV F protein based on ELISA using synthetic peptide.//Klin.Lab.Diagn.2018.Vol.63.№3.P.183–186 (in Russian).Постановление Правительства Российской Федерации от 1 декабря 2004 г. № 715 «Об утверждении перечня социально значимых заболеваний и перечня заболеваний, представляющих опасность для окружающих». – URL: http://fss.ru/ru/fund/social_insurance_in_russia/124/132/10297.shtmlPostanovlenie Pravitel’stva Rossijskoj Federacii ot 1 dekabrja 2004 g., №715; Ob utverzhdenii perechnja social’no znachimyh zabolevanij i perechnja zabolevanij, predstavljajushhih opasnost’ dlja okruzhajushhih; http://www.consultant.ru/document/cons_doc_LAW_50559/ (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.